規(guī)格參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
大腸埃希菌規(guī)格 | Escherichi | EY-J963314 |
資源名稱(chēng): 大腸埃希菌
種屬: Escherichia coli
分離基物: 腹瀉仔豬
提供形式: 凍干管，斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí): 2
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 科研及血清定型
培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。
傳代方法: ①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。
②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無(wú)菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件: 37℃，好氧。
存儲(chǔ)條件: 2-8℃冷藏，凍干管10年以上，斜面1-3個(gè)月。
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低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng)：
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線(xiàn)菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
Brevundimonassp. 中文名稱(chēng)：Brevundimonassp.Brevundimonassp.安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:108生長(zhǎng)條件:28℃ 純度：97%
Enrobacrcloacaesubsp.cloacae 中文名稱(chēng)：陰溝腸桿菌（陰溝腸桿菌陰溝亞種）Enrobacrcloacaesubsp.cloacae安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:37℃ 純度：98%
Klebsiella oxytoca 中文名稱(chēng)：產(chǎn)克雷伯氏菌Klebsiella oxytoca分離基物:鹵制品提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:37℃，好氧存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%
Bacillus subtilis subsp. subtilis 中文名稱(chēng)：枯草芽孢桿菌枯草亞種Bacillus subtilis subsp. subtilis提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:發(fā)酵產(chǎn)納豆激酶。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁培養(yǎng)基:蛋白胨 5.0g，3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。121℃，15min。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長(zhǎng)條件:35-38℃，好氧存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：>98.0%(HPLC)
Bacillus│lentus 中文名稱(chēng)：遲緩芽孢桿菌Bacillus│lentus分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：>98.0%(HPLC)
Pseudomonas putida 中文名稱(chēng)：惡臭假單胞菌Pseudomonas putida分離基物:臨床分離百特醫(yī)療用品公司提供形式:凍干管安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:質(zhì)量控制菌株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長(zhǎng)條件:30℃，好氧。存儲(chǔ)條件:2-8℃ 純度：97%
Alcaligenes│xylosoxidans subsp. xylosoxidans 中文名稱(chēng)：木糖氧化產(chǎn)菌木糖氧化亞種Alcaligenes│xylosoxidans subsp. xylosoxidans提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%
Aeromonas hydrophila 中文名稱(chēng)：嗜氣單胞菌Aeromonas hydrophila提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:質(zhì)量控制。Microscan產(chǎn)品質(zhì)量控制菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:30℃，好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：≥97%
大腸埃希菌規(guī)格瓊脂（條）人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞微RNA4-苯基異酯HPV16-E7/E7 protein(Human papillomavirus type 16) 人類(lèi)狀瘤病16抗原
50010人前列腺上皮細(xì)胞微RNA(R)-(+)-環(huán)氧烷Hpt/HP(haptoglobin) 結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗原
50020人前列腺成纖維細(xì)胞微RNA(R)-(+)-環(huán)氧烷H-ras/Ras/Ras p21 peptide 原癌基因H-ras抗原
50023人前列腺平滑肌細(xì)胞微RNA4-二甲氧基(易)HSTF2/HSF2 peptide 熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗原
28981人顱骨造骨細(xì)胞微RNA4-二甲氧基(易)BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐藥相關(guān)蛋白（抗原）
28982人滑膜細(xì)胞微RNA1,5-Anhydro-D-Sorbitol CrystallineHrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS樣抑制因子3抗原
028982A人髓核細(xì)胞微RNA1-(三乙酰)咪唑HSP47(Heat shock protein-47) 熱休克蛋白-47抗原
50100人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞微RNA1-(三乙酰)咪唑HSP-90 Alpha(Heat Shock Protein 90 Alpha ) 熱休克蛋白90α抗體
綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準(zhǔn)備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測(cè)；
（6）取液儲(chǔ)存；通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi)，菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。
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