小鼠原代肝實質(zhì)原代細胞
細胞培養(yǎng)操作：
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)
傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法：
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4.待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
商品屬性：
規(guī)格 | 只能凍存發(fā)貨，凍存管提供1管，數(shù)量5x106cells | 貨號 | EY-XY3668 |
種屬來源 | 小鼠 | 組織來源 | 肝臟 |
生長特性 | 貼壁生長 | 形態(tài)特征 | 上皮細胞樣 |
形態(tài)：上皮細胞樣
培養(yǎng)基：小鼠肝實質(zhì)細胞wan全培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代特征：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)
細胞基本屬性：
種屬來源：小鼠
組織來源：肝臟肝臟
生長特性：貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格：只能凍存發(fā)貨，凍存管提供1管，數(shù)量5x106cells
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：
產(chǎn)品貨期：2周左右
運輸方式：T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應(yīng)限制：僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：:小鼠肝實質(zhì)細胞采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心制備而來，小鼠肝實質(zhì)細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質(zhì)細胞是指具有肝功能的單位，是肝臟的基本組成單位之一。肝實質(zhì)細胞與主要病生理變化：急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實質(zhì)細胞屬于中高度分化細胞，生長營養(yǎng)需求高，在體外存活時間短；細胞呈圓形或多角形，核大而圓，居中，常染色質(zhì)豐富，部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內(nèi)重要的器官，在整個物質(zhì)代謝過程中具有廣泛而多樣的作用。
原代細胞培養(yǎng)的主要步驟包括：
?一、剝離組織，去除外膜、結(jié)締組織等?：將組織從動物體中取出，并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當?shù)木彌_液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進行消化。消化時間可根據(jù)具體實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。
?四、吹打分散后，過濾、計數(shù)?：將消化后的細胞吹打到一個離心管中，然后過濾、計數(shù)。
五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?：將計數(shù)后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。
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