勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1．基礎(chǔ)程序；
2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；
3．反應(yīng)時(shí)間；
4．循環(huán)次數(shù)；
5．PCR 反應(yīng)液的配制；
6．PCR技術(shù)的基本原理；
7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；
8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；
9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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以下是勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)的詳細(xì)說(shuō)明書(shū)：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗(yàn) |
英文名稱(chēng) | Rous Associated Virus（RAV）RTPCR |
編號(hào) | EY00P1117 |
使用方法：
注：勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
以下是勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)的相關(guān)產(chǎn)品，了解更多進(jìn)口PCR試劑盒點(diǎn)擊進(jìn)入。
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml
CD38 Others Rabbit 兔 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10
HFL-I細(xì)胞，人胚肺成纖維細(xì)胞 鼠肌原細(xì)胞,C2C12細(xì)胞 T-105BIII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
SK-N-SH(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HUVEC-c Growth Medium 2single donor 500,000cells 肺成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 Mouse
非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgR;VERO/IgR
大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞(RA)(5×105)
KM小鼠子瘤株;U14 小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人胚肝二倍體細(xì)胞;CCC-HEL-1
RK1 Others Human 人 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
胎兒表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
新生兒表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)； 規(guī)格；
CIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ) 英文名稱(chēng)； Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 規(guī)格； 250g
改良Y培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)； Agar Y，Modified 規(guī)格； 250g
改良磷酸鹽緩沖液PSB 英文名稱(chēng)； Phosphate Saline Buffer,Modified 規(guī)格； 250g
ITC肉湯 英文名稱(chēng)； ITC Broth 規(guī)格； 250g
含225mlGN增菌液均質(zhì)袋 GN Enrichment Broth 10個(gè)/包
含100ml GN增菌液均質(zhì)袋 GN Enrichment Broth 10個(gè)/包
含225ml志賀氏菌増菌肉湯均質(zhì)袋 Shigella Enrichment Broth 10個(gè)/包
含225ml7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋 7.5% NaCl Broth 10個(gè)/包
含50ml 7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋 7.5% NaCl Broth 10個(gè)/包
勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)MLCB寒天培地 用于沙門(mén)氏菌分離培養(yǎng)用途 : 用于沙門(mén)氏菌分離培養(yǎng)。用法稱(chēng)取本品 49.0g,加熱煮沸溶解于 1000ml 蒸餾水中,冷至 50-55℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿,備用。
GN增菌液（10ml） 主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng)，亦可用于沙門(mén)氏菌增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng)，亦可用于沙門(mén)氏菌增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
H-頂層培養(yǎng)基 用于鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)（Ames試驗(yàn)）用于鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)（Ames試驗(yàn)）產(chǎn)品用法：稱(chēng)取本品11.0g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝試管，每支2.5ml，121℃高壓滅菌20min，備用。
低營(yíng)養(yǎng)V-B培養(yǎng)基（底層） 用于鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)（Ames試驗(yàn)）用途:用于鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Ames試驗(yàn))。用法稱(chēng)取本品 50.7g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶,115℃高壓滅菌 30分鐘,備用。
需要自備的器材：
1．勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
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