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產(chǎn)品名稱 | 胎兒胸腺細(xì)胞株；HFT-8810[HFT8810] |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63470 |
細(xì)胞名稱 胎兒胸腺細(xì)胞株；HFT-8810[HFT8810]
形態(tài)特性:
生長特性: 貼壁生長
特征特性:
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法:
傳代情況: 不詳
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法（-）
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產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。
rmSDC4, C
D-氨酸Cyclin D2 (D52F9) Rabbit mAb叔丁基溴
D-氨酸Cyclin D2 (D52F9) Rabbit mAb6-甲基-氨基-2-吡啶
β-氨酸E2F-1 Antibody1-甲基--吡唑
β-氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Rig-I (D14G6) Rabbit mAb9-[羥基-(羥甲基)-丁基]-
D-Rig-I (D14G6) Rabbit mAb硫代酰
D-TAB2 (C88H10) Rabbit mAb吲哚-羧酸甲酯
D-JunB (G53) Antibody2,6-二溴-氨基吡啶
D-氨酸甲酯鹽酸鹽Proin G Agarose Beads2,二羥基吡咯[2,d]嘧啶
D-氨酸叔丁酯鹽酸鹽Proin G Agarose Beads6-氟吲哚
D-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser271) Antibody5-氟吲哚
非對稱二甲基Mouse Immune Cell Phenotyping IHC Antibody Sampler Kit芐,
N'-硝基-D-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser663) Antibody5-氟-2-甲基吲哚
D-天冬酰，一水Ingrin α6 Antibody1,二硫-2,5-二
D-天冬氨酸Phospho-SHP-2 (Tyr542) AntibodyN6-甲?；汆堰?/span>
D-天冬氨酸叔丁酯Phospho-SHP-2 (Tyr542) Antibody2,二-5-硝基三氟
D-SHP-2 Antibody三氟甲基-溴甲
TLCK(進(jìn)分)JunB (C37F9) Rabbit mAb2-氟-5-硝基三氟甲
甘氨酰-L-；甘洛二肽JunB (P169) Antibody對氟99%
D-高氨酸Jak3 Antibody(S)-(-)-氨基-2-羥基丁酸
D-焦Phospho-Jak2 (Tyr1007/1008) (C80C3) Rabbit mAb雙*基硅基基鋰
D-哌啶酸Phospho-EGF Receptor (Tyr1068) (D7A5) XP® Rabbit mAb2,4,6-*基芐
D-環(huán)基氨酸Phospho-EGF Receptor (Tyr1068) (D7A5) XP® Rabbit mAbD-焦
D-叔鹽酸鹽TFEB (D2O7D) Rabbit mAb五甲基環(huán)戊二
D-正c-Kit (D3W6Y) XP® Rabbit mAb氟
D-氨酸甲酯鹽酸鹽c-Kit (D3W6Y) XP® Rabbit mAb6-氨基-1-己
N-酰-D-Phospho-IRF-3 (Ser386) (E7J8G) XP® Rabbit mAb2,二基酸酯
CBZ-D-Phospho-IRF-3 (Ser386) (E7J8G) XP® Rabbit mAb氟-羥基
D-別異GCK Antibody氟-羥基甲
醋酸氟氫(標(biāo)準(zhǔn)品)OTUB1 (D8F7) Rabbit mAb5-溴-2-羥基甲
醋酸氟氫MX1 (D3W7I) Rabbit mAb4,4'-雙甲氧基*基
Thrombospondin-1 (D7E5F) Rabbit mAb4,4,三氟丁酸
噻奈普汀酸;噻奈普汀Phospho-Akt (Ser473) (736E11) Rabbit mAb5-基嘧啶
噻奈普汀酸;噻奈普汀(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-Akt (Ser473) (736E11) Rabbit mAb-2-丁酮
噻奈普汀鈉鹽Akt3 (62A8) Rabbit mAb2-氨基-溴酚
D-谷氨酰Akt3 (62A8) Rabbit mAb5-氨基-1,2,噻二唑
扎托p53 Antibody Sampler Kit1,10-二溴癸烷
細(xì)胞；NCI-H1395 RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
rmSCF (10 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素)；AtT-20 RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清，10%
rmSCARA5, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16 RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清，10%
rMSC (1 VL)細(xì)胞名稱: 小鼠淋巴瘤細(xì)胞；EL4 RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清，10%
rMSC細(xì)胞名稱: 小鼠肺癌細(xì)胞；LLC DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
rmS100A4, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠畸胎瘤細(xì)胞；F9 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
rmS100A13, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病細(xì)胞；L615 RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
rmR-Spondin 4, CF (25 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠骨髓瘤細(xì)胞；P3X63-Ag8 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
rmR-Spondin 4 (25 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠骨髓瘤細(xì)胞；P3X63-Ag8.653 RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
rmR-Spondin 3, CF細(xì)胞名稱: 小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞；P815 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)胎牛血清，10%
rmR-Spondin 3細(xì)胞名稱: 小鼠淋巴瘤細(xì)胞；P388D1(IL-1) RPMI1640(w/oHepes)馬血清，10%
rmR-Spondin 1, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞；RAW264.7[RAW264.7] DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
胎兒胸腺細(xì)胞株；HFT-8810[HFT8810]人銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒MHC/RhLAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人α1性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒MHCⅠ/AgBⅠ/H-1ⅠELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒MHCⅠ/H-2ⅠELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人類白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒MHCⅠ/HLAⅠELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒MHCⅠ/RLAⅠELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒MHCⅠ/SLAⅠELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒MHCⅡ/AgBⅡ/H-1ⅡELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人碳酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
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