人原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞MSC原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)操作：
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法：
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4.待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
商品屬性：
規(guī)格 | 5x105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 貨號(hào) | EY-XY3216 |
種屬來源 | 人 | 組織來源 | 臍帶 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) | 形態(tài)特征 | 梭形細(xì)胞 |
形態(tài)：梭形細(xì)胞
培養(yǎng)基：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基（無血清）
培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代特征：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
細(xì)胞基本屬性：
種屬來源：人
組織來源：臍帶臍帶
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
產(chǎn)品規(guī)格：5x105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：
產(chǎn)品貨期：現(xiàn)貨，1周左右
運(yùn)輸方式：T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應(yīng)限制：僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：:臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是一種能分化成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和軟骨細(xì)胞的多能干細(xì)胞。其具有強(qiáng)大的增殖能力，且參與構(gòu)成造血微環(huán)境，因此被廣泛應(yīng)用于組織工程，細(xì)胞治療和基因治療。人臍帶間質(zhì)干細(xì)胞取自健康足月分娩孕婦的臍帶，其擁有強(qiáng)大的自我更新能力并具有多向分化潛能。 臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長(zhǎng)部而形成的。臍帶中通過尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。當(dāng)卵黃囊及其血管退化，臍動(dòng)脈和臍靜脈就發(fā)達(dá)起來，在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質(zhì)。在子宮中，子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒來的廢物運(yùn)送至胎盤，臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。最后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運(yùn)走，某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒。臍帶中含有大量的干細(xì)胞，干細(xì)胞是生命的種子，它會(huì)分化成機(jī)體的各種細(xì)胞，結(jié)出各種不同的果實(shí)——血液細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、骨骼細(xì)胞等。干細(xì)胞是具有自我更新、高度增殖和多項(xiàng)分化潛能的細(xì)胞群體；這些細(xì)胞可以通過分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量，又可進(jìn)一步分化為各種組織細(xì)胞，從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞。在不同的誘導(dǎo)條件下，可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞，并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用；目前，多用于風(fēng)濕免疫疾病的治療。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞，存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長(zhǎng)因子，促進(jìn)造血干細(xì)胞(HSC)的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復(fù)作用，可減輕移植物抗宿主病(GVHD)及其他移植相關(guān)并發(fā)癥。
原代細(xì)胞培養(yǎng)的主要步驟包括：
?一、剝離組織，去除外膜、結(jié)締組織等?：將組織從動(dòng)物體中取出，并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進(jìn)行消化。消化時(shí)間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時(shí)間短，冷消化時(shí)間長(zhǎng)但條件更溫和。
?四、吹打分散后，過濾、計(jì)數(shù)?：將消化后的細(xì)胞吹打到一個(gè)離心管中，然后過濾、計(jì)數(shù)。
五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?：將計(jì)數(shù)后的細(xì)胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。
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